1. 前言：
1.1. 计算细胞数目可用血球计数盘或是自动粒子计数器(Coultercounter)，可依实验需要使用之。
1.2. 血球计数盘有二个chamber，每个chamber中细刻 9 个 1 mm2之大正方形，其中位於4个角落之正方形再细刻16个小格，深度均為0.1 mm。当chamber上方盖上盖玻片后，每个大正方形之体积為1 mm2 x0.1 mm = 1.0 x10-4 ml 。使用时，计数每个大正方形内之细胞数目，乘以稀释倍数，再乘以104，即為每 ml中之细胞数目。
1.3. 存活测试之步骤为dye exclusion，利用染料 (例如trypan blue)会渗入死细胞中而呈色，而活细胞因细胞膜完整，染料无法渗入而不会呈色。
2. 材料：
2.1. 0.4% w/v Trypan blue
2.2. 血球计数盘 (Hemocytometer) 及盖玻片
2.3. 计数器(counter)
3. 步骤：
3.1. 取100 ul 细胞悬浮液与100 ul trypan blue 等体积混合均匀。
3.2. 取少许混合液﹙约15 ul)自血球计数盘chamber上方凹槽加入，盖上盖玻片，於100倍倒立显微镜下观察，活细胞不染色， 死细胞则為蓝色。
3.3. 计数四个大方格之细胞总数，再除4，乘以稀释倍数﹙至少乘以2 ，因与trypanblue等体积混合﹚，最后乘以104，即为每 ml中细胞悬浮液之细胞数。
4大格细胞总数 x 2 x 104 / 4 = 细胞数/ml
3.4. 若不用血球计数盘，可用自动粒子计数器 (Coulter counter, CoulterElectronics) 作自动计数， 但无法辨别死细胞或活细胞。
3.5. 若细胞数目太多，可先用phosphate buffer saline (PBS)稀释后再计数之。若细胞沉淀物太多而干扰染色与计数， 可将其离心处理后 (1000 rpm, 5分钟)，再计数之。